作者：漯河市中心医院检验科 朱俊民
自身免疫性抗体检测是自身免疫性疾诊治中的重要工具。随着早期诊断、规范化治疗的开展，自身抗体检测在疾病诊断、监测、以及预后评估中发挥的作用，日益受到临床医生重视。我院很早就成立了风湿免疫科，为了满足不断增加的患者需求，2019年年底风湿免疫科从血液风湿科分离出来，成立了独立的风湿免疫科病区。我院检验中心同时开展了自身免疫性抗体的相关检测，助力于临床医生的整个诊疗过程。在此对自身免疫病、自身免疫性抗体检测和应用做一概述，为临床医生、检验医师和自免患者提供参考。
一 自身免疫性疾概述
自身免疫性疾病是由于免疫功能紊乱，机体产生针对自身抗原的病理性免疫应答，从而引起器官或系统损伤的一类疾病。根据临床表现和病变累及的范围，自身免疫性疾病可以分为系统性自身免疫病和器官特异性自身免疫病。前者以系统性红斑狼疮(SLE）、系统性硬化症(SSG)、类风湿关节炎（RA）、抗磷脂综合征(APS)等为代表；后者包括自身免疫性肝炎(AIH)、原发性胆汁性肝硬化（PBC)、自身免疫性甲状腺炎(AIT)、胰岛素依赖性糖尿病（IDDM）。免疫性疾病的发病机制尚不完全清楚，目前认为是遗传易感个体在环境因素如感染、紫外线、肿瘤、药物等多种因素共同作用下发生。
二 自身抗体的分类、临床意义和检测方法
1 系统性自身免疫性疾病相关抗体
(1)抗核抗体(ANA)
抗核抗体(ANA)是一组将自身真核细胞的各种成分脱氧核糖核蛋白、DNA可提取核抗原和RNA等作为靶抗原的自身抗体的总称，是系统性自身免疫疾病最重要的诊断指标之一。ANA的检测方法很多，目前间接免疫荧光法仍然是ANA检测首选方法。ANA阳性提示体内存在一种或多种自身抗体，应结合其他临床资料判定其意义。
(2)抗可提取核抗原(ENA)抗体谱
ANA的靶抗原众多，采用盐析法从细胞核中提取出来，且不含DNA的一类抗原统称为ENA。临床常用抗ENA抗体主包括抗Sm、U1—RNP、SSA、SSB、Jo-1、Scl-70和核糖体P蛋白抗体等。其中抗U1-RNP抗体可在多种风湿性疾病出现，但高滴度抗U1-RNP抗体对混合性结缔组织病（MCTD)有诊断意义。抗Sm抗体是SLE高度特异性的血清学标记物。抗SS-A和/或抗SS-B阳性是诊断干综合征的血清标志物。抗Sc-70抗体是系统性硬化症分类标准中的血清学标记物。抗JO-1抗体在皮肌炎（DM）或多发性肌炎(PM)患者中的阳性率约为25%-30%。目前这些抗体常用检测方法是化学发光免疫法和免疫印迹法（IB）。
(3)抗双链DNA(dsDNA) 抗体
该自身抗体对诊断SLE有较高的特异性（95%）， 是SLE分类标准之一，其抗体滴度在多数SLE患者中与病情活动程质相关，可作为治疗监测和预后评价的指标。目前公认的检测方法为间接免疫荧光法(IIF)和化学发光免疫法。
(4)抗核小体抗体(AnuA)
抗核小体抗体可出现于系统性红斑狼疮的早期,并且敏感性、特异性均较高。SLE患者中阳性率为50%-90%，特异性>90%，目前常用的检测方法为化学发光免疫法。
(5)抗C1q抗体
抗C1q抗体除与低补体血症荨麻疹性血管炎、类风湿关节炎等相关外，与SLE患者并发狼疮性肾炎及其活动性也密切相关，目前常用的检测方法化学发光免疫法。
(6)抗磷脂抗体谱
抗磷脂抗体谱主要包括狼疮抗凝物(LA)、抗心磷脂（CL）抗体、抗B2-糖蛋白1(B2-GP1)抗体、抗凝血酶原（PT)抗体和抗磷脂酰丝氨酸(PS）抗体等，在我国SLE患者中检出率约内20%6-30%，是SLE预后不良的重要标志不。检测LA或抗CL-IgG/IgM或抗β2-GP1-IgG/IgM是诊断抗磷脂综合征（APS)的血清学标志物。LA通过体外凝血时间来定性测定，其它抗体常通过化学发光免疫法进行定量检测。
（7）抗中性粒细胞胞浆抗体 ANCA
ANCA的靶抗原有十余种，与临床最相关的是蛋白酶3（PR3）和髓过氧化物酶（MPO）,两者与ANCA相关血管炎，即肉芽肿性多血管炎(GPA)、酸性肉芽肿性多血管炎（EGPA)以及这些疾病的肾肚表现切相关的(和ELISA联合应用是检调ANCA的最佳方法
（8)抗内皮细胞抗体（AECA)
AECA与血管炎和多种风湿病中的血管内皮损伤有关，如白塞病、肉芽肿性多血简炎、系统性红斑狼疮、系统性硬化症、过敏性紫癜肾炎(HSPN)等。抗体滴度与病情活动性具有相关性。目前检测AECA常用的方法是ELISA和化学发光法。
（9）类风显因子RF
IgM- RF在类风湿关节炎(RA)患者中的阳性率为70%-90%,IgA-RF和IgG-RF对类风湿关节炎的诊断也可能有一定提示意义。免疫比浊法、 ELISA和化学发光法是目前常用的RF定量检测方法。除RA外，RF也可见于其它自身免疫性病、多种感染以及肿瘤性疾病等。
10）抗瓜氨酸化蛋白/肽抗体(ACPA)
ACPA是一组对RA高度特异的自身抗体，可出现在类风湿关节炎早期，同时与类风湿关节炎病情活动性指标呈相关性，目前常用检测方法为间接免疫获光法。抗环瓜氨肽CCP）抗体是RA最新的分类标准中的血清学检测项目之一，敏感性、特异性均较好。目前检测的最常用方法是化学发光法。
2 自身免疫性肝病（AILD）相关自身抗体
自身免疫性肝炎（AIH）和原发性胆计性肝硬化(PBC)相关ANA谱
ANA在AIH患者中阳性率可高达70%-80%,是疾病诊断评分的指标之一，但是缺乏疾病特异性。PBC患者ANA阳性率为50%左右，在抗线粒体抗体(AMA)阴性PBC患者中的阳性率可达85%。AMA是PBC的标志性抗体，阳性率在90%-95%之间。
根据靶抗原不同分为9个亚类，即M1~M9,与PBC紧密相关的是M2、M4M8和M9 AMA-M2是PBC特异性和敏感度最强的诊断指标，M4常与M2并存，而M9阳性常提示患者处于PBC的早期。IIF和化学发光法，常用于AMA筛查.区分亚型常用免疫印边法。
三 《自身抗体检测在自身免疫性疾病中的临床应用专家建议十三条
本《建议》为广大临床医生和检验医师在日常疗实践中拟定检测项目及检测流程时提供参考、自身抗体检测的合理应用有赖于检验医生和临床医生的共同合作。
(1)对临床怀疑有自身免疫性疾病的患者建议进行自身抗体的检测。疾病分类或诊断标准中列出的自身抗体应在检测之列。需要结合患者病史、症状、体征及自身抗体水平等对自身免疫性疾病进行诊断及鉴别诊断。
(2)自身抗体的检测建议选用国际推荐（或公认)的检洲方法
自身抗体常用的检测方法包括间接免疫苏光法、免疫印迹法、酶联免疫吸附法、免疫散射比浊法、化学发光免疫法、免疫胶体金法、乳胶凝集法、放射免疫法、免疫斑点法等。目前国内常用的定性检测方法较多，国外更多采用定量检测方法。
(3)自身抗体的检测结果建议以定量或半定量方式表达
自身抗体检测结果应尽可能以定量方式表达如无法进行定量检测，建议选用半定量方式，对临床有更好的参考意义。部分自身抗体超过正常值上限三倍以上可视为高滴度阳性。定量或半定量显示结果有利于疾病前后或治疗前后进行比较，对疾病的监测和疗效评估有重要价值。
(4)当自身抗体检验结果与临床情况不符时，建议结合患者性别、年龄、病史及其它实验室指标等特点，对检验结果作出适当解释及下一步建议。
对临床高度疑似自身免疫性疾病的患者，如果某一种方法检测自身抗体结果为阴性或转阳性，或当阳性的检测结果与临床特点不符时建议使用另二种检测方法对结果加以确认。临床医师和检验科医师应在必要时针对患者的临床及实验室结果特点进行沟通，共同商议决定下出步检测项目或给患者何种建议。
